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来源:学生作业帮 编辑:搜狗做题网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/08/05 19:13:30
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中文摘要

目的 : 前期工作的发现苦瓜蛋白M28可上调THP-1源性泡沫细胞ABCA1的表达而减少其细胞内的脂质蓄积,但其机制不清楚。
方法 :qRT-PCR 和western blot分别检测ABCA1 mRNA和蛋白表达水平,液体闪烁计数法测定胆固醇流出,油红O染色法测定胞内脂质蓄积,统计学分析采用均数±标准差(±SD)表示,用Graphpad Prism5.0.1对数据进行分析和作图,选取95%可信区间,P<0.05为差异有显著性意义。油红O染色检测泡沫细胞内脂质,高效液相色谱检测细胞内胆固醇和胆固醇脂。Western blot 则检测THP-1源性泡沫细胞中的蛋白表达
结果 :苦瓜蛋白MD28下调ABCA1表达,苦瓜蛋白MD28剂量(0mg/ml、0.4 mg/ml、1.2 mg/ml、3.6 mg/ml、5 mg/ml)和时间(0h、6h、12h、24h、48h)依赖性地上调ABCA1 mRNA 及蛋白的表达水平,以1.2 mg/ml作用12h最为显著。减弱苦瓜蛋白MD28对ABCA1的上调作用,并减少THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出和增加胞内的脂质蓄积。
结论 :苦瓜蛋白MD28剂量和时间依赖性地上调THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1 mRNA 及蛋白的表达水平,增强胆固醇流出,减少脂质蓄积
关键词 :苦瓜蛋白MD28;ABCA1;胆固醇流出; 脂质蓄积
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Purpose: the prophase work found that bitter melon protein M28 can raise THP 1 source sex foam cell ABCA1 expression and reduce its intracellular lipid accumulation, but its mechanism is not clear.
Methods: qRT PCR and western blot detection respectively ABCA1 mRNA and protein expression level, liquid scintillation counting method for determination of cholesterol, oil red O staining method determination of intracellular lipid accumulation, statistical analysis using mean + / - standard deviation (+ / - SD) said that using Graphpad Prism5.0.1 to analyze data and drawing, 95% confidence interval, P < 0.05 for the difference has a significant meaning. Oil red O staining test bubble lipids in the cell, high performance liquid chromatography (HPLC) to detect intracellular cholesterol fat and cholesterol. Western blot detection THP - 1 source sex protein expression in foam cells
Results: the expression of balsam pear cut ABCA1 protein MD28, bitter melon protein MD28 dose (0 mg/ml, 0.4 mg/ml, 1.2 mg/ml, 3.6 mg