设有一基因5'端和3'端部分序列如下:
来源:学生作业帮 编辑:搜狗做题网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/07/07 23:25:28
设有一基因5'端和3'端部分序列如下:
ATTG ACG ATT GGT GTA TCG.CTA ATT GAG ACC TAA 请设计一对PCR引物,写出其序列,使其扩增产物的5'末端加上HidⅢ位点(AAGCTT),3'端加上SmaⅠ位点(CCCGGG),一边酶切后插入至某质粒的的对应位点中.(本题为2007年南京大学分子生物硕士考题)
ATTG ACG ATT GGT GTA TCG.CTA ATT GAG ACC TAA 请设计一对PCR引物,写出其序列,使其扩增产物的5'末端加上HidⅢ位点(AAGCTT),3'端加上SmaⅠ位点(CCCGGG),一边酶切后插入至某质粒的的对应位点中.(本题为2007年南京大学分子生物硕士考题)
![设有一基因5'端和3'端部分序列如下:](/uploads/image/z/5228835-51-5.jpg?t=%E8%AE%BE%E6%9C%89%E4%B8%80%E5%9F%BA%E5%9B%A05%27%E7%AB%AF%E5%92%8C3%27%E7%AB%AF%E9%83%A8%E5%88%86%E5%BA%8F%E5%88%97%E5%A6%82%E4%B8%8B%EF%BC%9A)
在PCR引物中添加酶切位点的时候,必须加上保护碱基以保证后续的酶切顺利尽行,如无保护碱基,酶的活性往往会很低,因此最终的引物序列应该为:
FD:gcatg AAGCTT ATTG ACG ATT GGT GTA TCG
RD:atata CCCGGG TTA GGT CTC AAT TAG
其中,保护碱基因酶的不同可以适当增减个数,其次,它的碱基序列最好能和引物相补充,不会引起链内结构最好.
FD:gcatg AAGCTT ATTG ACG ATT GGT GTA TCG
RD:atata CCCGGG TTA GGT CTC AAT TAG
其中,保护碱基因酶的不同可以适当增减个数,其次,它的碱基序列最好能和引物相补充,不会引起链内结构最好.