都是十多分的大题1分离到一株具有A水解酶活性的细菌,发现A水解酶催化化合物A到化合物B的反应,而B是棕色,该细菌不能以A

都是十多分的大题
1分离到一株具有A水解酶活性的细菌,发现A水解酶催化化合物A到化合物B的反应,而B是棕色,该细菌不能以A或B为唯一C源和能源,该水解酶是第一次发现,在GenBank中没有任何编码该酶的基因序列存在,请你设计一种方案从该细菌克隆和鉴定编码A水解酶的基因.
2结合SARS和禽流感病毒,论述病毒在物种之间的遗传,突变,进化的关系
3在琼脂糖凝胶电泳中,一条带是否可能含有多于一个类型的DNA,为什么

1.1）将含有A水解酶基因的细菌基因组提取出来,
2）用限制性内切酶将其基因组切成几个片段,用同样的限制性内切酶将大肠杆菌质粒切一个缺口,将各DNA片段导入质粒中.
3）将质粒导入大肠杆菌并在含有A底物的平板中涂布培养,并使质粒基因表达.（对照为普通肉汤培养基）,如果某些菌落呈现棕色,那么说明该菌落中有A水解酶基因.
2.病毒进化的主要工具就是基因突变,基因突变是病毒变种的根本原因,突变也是病毒适应环境谋求生存的重要方式,突变是遗传进化的基础.病毒作为一种独立的生物群体,其进化也必然符合达尔文的自然选择学说(natural selection theory) .病毒为更好地生存、更好地适应环境,必然要发生多样性的突变.病毒的突变与进化有着和普通细胞生命不同的特征.例如其速度就比一般生命快的多,SARS病毒研究推测SARS 冠状病毒的大致年龄为230 年,其范围大约在195～265年,这是多细胞生命进化速度的近万倍.所以病毒的突变与进化方式一直是病毒学重要部分.
病毒进化与突变的主要方式有：
1、病毒基因突变的一般特点：病毒的复制每日数以亿计,RNA(核糖核酸) 病毒转录酶不具有校对功能其错配率在十万分之一到万分之一,远高于寄主细胞.由于DNA(脱氧核糖核酸) 病毒聚合酶有纠错功能,其突变率远低于RNA病毒,但也大大超过寄主细胞.而乙肝病毒(HBV) 的复制由前基因组RNA 中间体反转录为负链DNA ,反转录是利用病毒自身的DNA 聚合酶进行的,此酶缺乏校对功能,发生突变后难以修正,造成复制过程中反转录失真,故其突变高于其他DNA 病毒4 个数量级,而低于RNA 病毒1～2 数量级.高速的复制及高度的突变率增加了病毒的基因多样性,为其突变和进化提供了首要条件.点突变通常发生在密码子第三个核苷酸,多是一种无表型突变(nonphenotypic mutation) ,而发生在密码子第一、二个核苷酸的突变,可能引起氨基酸的改变,在关键位置上核苷酸的突变造成的错义突变(missense muta2tion) ,可影响病毒的复制和病毒蛋白的表达.如果该处核苷酸分别参与重叠的开放读码框,则单一位点的突变可改变2个开放读码框8.突变可引起抗原位点上关键部位的氨基酸的替换,从而使蛋白质产生新的构象,导致新抗原性的出现.变异的方式可以是各种各样的,包括核苷酸的转换、颠换、插入、缺失、分子内重组(recombination) 、核酸节段之间的重配(reassortment) 、病毒基因和寄主基因的整合等.病毒和寄主的核酸相互作用,可以快速扩大病毒核酸的多样性.如寄主核酸上发现病毒癌基因(v n oncogene) ;在黄病毒的基因组上发现寄主泛素(ubiquitin) 等核酸成分的插入,等等.
2、基因突变和跨宿主进化
一般所谓的新病毒,除了少数是在本身宿主中突变产生的,其余大部分都是因为宿主的改变而产生的.在同一群宿主中,为了使病毒和宿主和谐发展,病毒的毒性会趋于缓和.所以,一般像非典和禽流感这类强毒性病毒,大部分起源于变宿主基因突变与进化.物种之间的病毒由于宿主的变化而产生的病毒跨宿主传播越发显得严重.SARS、禽流感、HIV-1、HIV-2都是从非人类病毒演化而成.SARS是由于广东人吃果子狸和蓝孔雀产生的,禽流感是由于人类长期饲养禽类并与起接触产生的,HIV-1是从黑猩猩身上的猿免疫缺陷病毒越过种间障碍传给了人类,HIV-2病毒是人类食用乌白眉猴传染上的猿免疫缺陷病毒.
虽然简单的突变使病毒躲避了寄主免疫系统的杀伤,但是病毒过快的变异也限制了病毒的大小,一般RNA病毒变异速度比DNA病毒要快一到两个数量级,所以RNA病毒的最大尺寸也比DNA要小一个数量级,限制了病毒的进化和功能.
3、遗传物质横向传递与病毒进化
病毒和宿主之间也会有遗传物质的交流.一个病毒进入细胞后,也会有同种病毒进入,它们之间的基因交流不仅可以“交换经验”,也可以“追溯祖先”,以致交流在变异过程中失去的有用的基因.
病毒学论坛,自由学术论坛,病毒学,交流,病毒,virus,virology,cell,immunoloy,culture 病毒之间可以通过基因组片段的重组( recombination) 或重配( reassortment) 交换遗传信息,这是病毒在自然选择过程中继续生存所必需的.两种或多种病毒同时感染一个宿主细胞为病毒之间遗传信息的交换提供了机会.此外,病毒与细胞基因组之间也存在遗传信息的交换,许多病毒基因组中都存在与宿主高度同源的序列就是最好的证明.这种遗传信息的交换在病毒进化中扮演了一个的重要角色.
3.有可能：因为,1）琼脂糖凝胶电泳的分辨率有限,分子量相近的不同核酸片段可能在一个带里,2）可能,因为DNA的分子构象可能不一样,我们做过一个是实验,质粒DNA的酶切反应,跑的最快的是分子质量最大的DNA,因为它高度螺旋,所以运动阻力小,可以想象,如果有足够小的DNA,很可能跑的和它一样快的