关于单酶切,片段和载体

关于真核载体的构建真核载体的构建的要点和基本原则是什么表达载体 处理DNA（包括载体酶切和目的片段获得的片段）后的平滑末端还需要去磷酸化吗? PCR扩增出目的片段之后为什么要酶切?酶切下来的是目的片段和载体?然后再把它们连起来?很困惑. 求推荐克隆载体和表达载体 关于中秋和月亮的片段 如果将PCR扩增的X基因片段与克隆载体连接,并转化入宿主大肠杆菌中,写出技术路线（包括基因和载体的连接、转化和鉴定）和关 关于 克隆的问题.假如我有有一个基因片段,未知序列.我可以把它连接到T载体,然后PCR 如何能够在双元载体里面插入目的片段 目的基因片段与载体质粒的选择? 目的基因片段与载体DNA连接的主要有? 目的片段连接表达载体后酶切出非特异带为什么 载体和目的片段连接目的片断与载体的摩尔比大于3-10：1.摩尔数怎么确定?除了用分光光度计测OD,同门说跑胶能估算,请问