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用质粒载体进行外源 DNA 片段克隆,经抗生素筛选为何会出现假阳性?如何防止假 阳性的产生?

来源：学生作业帮 编辑：搜狗做题网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/08/07 07:52:31
用质粒载体进行外源 DNA 片段克隆,经抗生素筛选为何会出现假阳性?如何防止假 阳性的产生?
麻烦有经验的大哥大姐详细给教导一下!
用质粒载体进行外源 DNA 片段克隆,经抗生素筛选为何会出现假阳性?如何防止假 阳性的产生?
质粒被切以后,和目的基因放在一个体系中,加入DNA连接酶,有可能质粒在切口处重新接上.这样的 质粒上面有标记基因,但没有目的基因.因此,这样的质粒导入受体细胞后也有抗性.这就是假阳性.还有一种假阳性,就是目的基因和质粒在连接时,方向接反了.如何防止假阳性,方法有三种.第一,用同尾酶去切,可防止质粒自身环化；第二、用双标记基因法,如抗氨苄青霉素基因和抗四环素基因两个标记基因,这个方法一句话给你说不清楚,先简单了解一点；第三、用基因探针去检测,这个方法是最可靠的.
再问： 听起来确实是抽象了点，假如这是一道开放题呢，你会如何作答？
再答： 你的题目已经很开放了，应该找一些具体的题目，一点一点地消化理解。
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