搜狗做题网液相脯氨酸重复性差Agilent1200的仪器 测脯氨酸时重复性很差 其他氨基酸却正常 这是什么原因啊
来源：学生作业帮 编辑：搜狗做题网作业帮 分类：综合作业 时间：2024/08/15 22:01:17
液相脯氨酸重复性差
Agilent1200的仪器 测脯氨酸时重复性很差 其他氨基酸却正常 这是什么原因啊
Agilent1200的仪器 测脯氨酸时重复性很差 其他氨基酸却正常 这是什么原因啊
先问一下你的重复性指的是进样重复性,还是平行六个样品的精密度重复性?反正不是样品的问题就是方法的问题.
不知道你的试验方法是什么.不过一般氨基酸检验的重复性并不是很好.我做过在线衍生的氨基酸,重复性的rsd能达到5%就不错了.
样品现用现配,如果做进样重复性就将样品低温放置?1200好像不带样品冷藏的功能,那放在冰箱里,用的时候拿出来进一针,然后看看情况.
另外,脯氨酸的酸碱破坏试验有没有做过?看样子应该是不耐碱,强酸中可能也不太稳定吧?你的流动相pH值是多少?水相pH值尽量往中性调节.溶剂也最好用水之类的中性溶液溶解.
再问： 进样重复性 样品、方法都没问题 做的柱前衍生 其他氨基酸都没有问题 只有脯氨酸不好 pH7.8的磷酸盐（这个方法不能改动）应该不会是酸碱性的事 1200是可以带冷却器的
再答： 柱前衍生……这个方法不是很稳定。你的衍生试剂对活性要求很高。你的衍生试剂是新配置的，并且4℃保存吗？
我当时做的时候除了衍生试剂，就连其他试剂，好像是硼酸缓冲液，也要现用现配。
其实衍生过程本来就是不太好说，在衍生的过程中对仪器（那个兹拉兹拉的混合过程），还有试剂、样品的要求都比较高。我当时做的复方氨基酸，就把其中两个不稳定的氨基酸提出来做电位滴定法了。
你的进样程序是什么？可以做一下类似于方法筛选的调整。改变混合次数还有调整衍生试剂和缓冲液的比例可能会让你的重复性更好。
再问： 衍生剂是买的 也是低温保存 进样程序是先样品 硼酸盐 衍生剂1 2 水 做柱后衍生实现不了 这个不用考虑了
再答： 那你要是这么说的话就比较麻烦了。
样品没有问题，试验方法不能调整。那只能说这个方法不适合检验脯氨酸了，重复性不好了。
再问： 方法是氨基酸通用的方法 可能只是不太适合脯氨酸 现在考虑会不会是检测器灵敏度的问题 或者某种原因导致衍生不完全
再答： 衍生不完全是有可能的，检测器的灵敏度应该不会有问题。如果你的方法确确实实不能变动，我还是建议加大样品中脯氨酸的浓度。这样对应的脯氨酸的峰面积会变大（当然，先要保证分离度）
看看变化幅度是不是也跟峰面积成正比。如果只是方法的准确度不好，那么增大浓度可以减小一定的误差。如果真的是衍生不完全，那就只能调整衍生方法。或者照我说的，把脯氨酸单独拿出来做电位滴定法。
不知道你的试验方法是什么.不过一般氨基酸检验的重复性并不是很好.我做过在线衍生的氨基酸,重复性的rsd能达到5%就不错了.
样品现用现配,如果做进样重复性就将样品低温放置?1200好像不带样品冷藏的功能,那放在冰箱里,用的时候拿出来进一针,然后看看情况.
另外,脯氨酸的酸碱破坏试验有没有做过?看样子应该是不耐碱,强酸中可能也不太稳定吧?你的流动相pH值是多少?水相pH值尽量往中性调节.溶剂也最好用水之类的中性溶液溶解.
再问： 进样重复性 样品、方法都没问题 做的柱前衍生 其他氨基酸都没有问题 只有脯氨酸不好 pH7.8的磷酸盐（这个方法不能改动）应该不会是酸碱性的事 1200是可以带冷却器的
再答： 柱前衍生……这个方法不是很稳定。你的衍生试剂对活性要求很高。你的衍生试剂是新配置的，并且4℃保存吗？
我当时做的时候除了衍生试剂，就连其他试剂，好像是硼酸缓冲液，也要现用现配。
其实衍生过程本来就是不太好说，在衍生的过程中对仪器（那个兹拉兹拉的混合过程），还有试剂、样品的要求都比较高。我当时做的复方氨基酸，就把其中两个不稳定的氨基酸提出来做电位滴定法了。
你的进样程序是什么？可以做一下类似于方法筛选的调整。改变混合次数还有调整衍生试剂和缓冲液的比例可能会让你的重复性更好。
再问： 衍生剂是买的 也是低温保存 进样程序是先样品 硼酸盐 衍生剂1 2 水 做柱后衍生实现不了 这个不用考虑了
再答： 那你要是这么说的话就比较麻烦了。
样品没有问题，试验方法不能调整。那只能说这个方法不适合检验脯氨酸了，重复性不好了。
再问： 方法是氨基酸通用的方法 可能只是不太适合脯氨酸 现在考虑会不会是检测器灵敏度的问题 或者某种原因导致衍生不完全
再答： 衍生不完全是有可能的，检测器的灵敏度应该不会有问题。如果你的方法确确实实不能变动，我还是建议加大样品中脯氨酸的浓度。这样对应的脯氨酸的峰面积会变大（当然，先要保证分离度）
看看变化幅度是不是也跟峰面积成正比。如果只是方法的准确度不好，那么增大浓度可以减小一定的误差。如果真的是衍生不完全，那就只能调整衍生方法。或者照我说的，把脯氨酸单独拿出来做电位滴定法。