乳鼠肝脏细胞原代培养如何进行?求具体的方法步骤

来源：学生作业帮编辑：搜狗做题网作业帮分类：生物作业时间：2024/08/06 19:50:43

博凌科为生物科技-为你一周龄大鼠,断颈处死,活力碘消毒,无菌取出肝脏,于无菌维持液中漂洗,用眼科剪仔细清除肝包膜,韧带,沿肝边缘剪切肝尖组织(绕开肝蒂等)转入青霉素小瓶中,用眼科剪绞碎,剪成0.1-1.0mm3大小的碎片,加入5倍体积无菌维持液,用滴管轻轻吹打,吸出上层血细胞再用无菌维持液反复清洗3~5次,加入10倍体积无菌胰蛋白酶消化液,37℃消化,消化过程中不断震荡,至组织块边缘变薄(镜下观),离心 (1000rpm,10分钟)弃去上面酶液,用无菌维持液将组织块清洗2~3次,加入新鲜无菌胰蛋白酶消化液重复上述步骤.此时组织块边缘模糊,1000rpm离心10分钟,取沉淀即为消化下的细胞,重新用无菌维持液悬浮,离心,洗1~2次,用20%生长液悬浮即得细胞悬液；将消化过的组织块重复消化5~6次至组织块消化完全,重复以上操作,合并几次所得细胞悬液,计数,调整细胞浓度为210 5 个细胞/mL,将细胞悬液接种于塑料培养瓶中,置于37℃,5%CO2,饱和湿度培养箱中培养.培养48小时后,换新鲜配置的培养液培养5小时,可除去绝大部分血细胞及杂细胞,37℃,5%CO2,饱和湿度培养箱中培养,每隔3天换培养液,获得单层肝细胞.

培养第1代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养原代培养. 如何改进动物细胞原代培养技术,来减少微生物的污染? 我想做细胞原代培养,求推荐好的生物技术中心? 怎样提高细胞原代培养的效率? 威斯腾生物培养的原代细胞好不好? 如何进行骨膜细胞的传代培养细胞的原代培养与传代培养的区别以表格的形式细胞的癌变发生在原代培养到传代培养过程中吗细胞工程动物细胞培养的传代培养一般是在原代培养的什么时候或者第几代? 动物细胞工程的动物细胞培养的原代培养是指第一代还是前十代? G418原代细胞如何筛选? 动物细胞培养为什么要进行原代培养