在含卡那的培养板和培养基中都长,菌液PCR也有,就是提不出来质粒
来源:学生作业帮 编辑:搜狗做题网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/08/17 13:30:46
在含卡那的培养板和培养基中都长,菌液PCR也有,就是提不出来质粒
用pET
30a构建原核表达载体,连接产物转化,长了满板,条单克隆到含卡那的液体培养基中,长了,菌液PCR有条带,但提质粒提不出来
而且,又用能扩出来的菌液划板,再挑单克隆,再扩菌液PCR,就又扩不出来了,我怀疑是切胶回收产物不纯,有原质粒污染,但为什么什么质粒都提不出来。直接诱导表达,会不会太着急了,在没有确定真的连进去目的基因的情况下
用pET
30a构建原核表达载体,连接产物转化,长了满板,条单克隆到含卡那的液体培养基中,长了,菌液PCR有条带,但提质粒提不出来
而且,又用能扩出来的菌液划板,再挑单克隆,再扩菌液PCR,就又扩不出来了,我怀疑是切胶回收产物不纯,有原质粒污染,但为什么什么质粒都提不出来。直接诱导表达,会不会太着急了,在没有确定真的连进去目的基因的情况下
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pET 30a 在菌内是偏保守的质粒,拷贝数比较低,建议你做大提质粒,否则带很暗,看不清.
还有,既然你已经菌液PCR有条带了,为什么不诱导表达做western来验证下有没有表达产物?
还有,既然你已经菌液PCR有条带了,为什么不诱导表达做western来验证下有没有表达产物?
如果质粒与目的基因结合的重组DNA和不含目的基因的质粒,同时在培养基中表达,怎样区分和筛选出目的基因?
在含乳糖和葡萄糖的培养基中培养大肠杆菌
带质粒的细菌在EB培养基中培养后为什么会有不带质粒的细菌出现
质粒DNA的转化实验中在含Amp的选择性培养基上出现菌落,但阴性对照也有菌落出现,这说明什么?原因是什么
DMEM成分我看到我们实验室培养细胞用的DMEM培养基(高糖型)有含丙酮酸钠和不含丙酮酸钠的,不知道有没有什么区别对细胞
质粒DNA的转化实验中在含Amp的选择性培养基上实验组和阴性对照都没有菌落出现,这说明什么?原因是什么
培养细菌的培养基和培养真菌的培养基有什么区别
用同种限制酶切质粒和目的基因DNA,连接后,产生的载体-载体连接物不是也有标记基因而且在培养基上生长吗
科赫法则的应用意义科赫法则为:1 在每一病例中都出现这种微生物;2 要从寄主分离出这样的微生物并在培养基中培养出来;3用
我现在提的DNA的OD值都在1.8左右,含量也在300左右,但是为什么用mix做PCR的时候,做不出来?
为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急
假设取一个含有一对同源染色体的受精卵,用32P标记细胞核中的DNA,然后放在不含32P的培养基中培养,让其连进行两次有丝