搜狗做题网β-Actin抗体是Western Blot很好的内参指数,是啥意思?β-Actin在整个Western Blot的作用
来源：学生作业帮 编辑：搜狗做题网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/08/20 00:56:23
β-Actin抗体是Western Blot很好的内参指数,是啥意思?β-Actin在整个Western Blot的作用是什么?而且能不能详细介绍下Western Blot的抗体了?本人刚学这个,不懂,望高人指导,不胜感激.
描述有问题.抗体检测的是抗原,所以你检测的是β-Actin
做western很重要的一点就是要有一个参照,比如你要检测淋巴细胞某个蛋白的表达,甚至它的变化（比如对某个细胞因子的反应）,这时β-Actin起到几个作用：
1、如果目的蛋白检测不到而且β-Actin也检测不到,那么你的体系有问题,因为β-Actin是看家基因编码的,理论上是100％检测到的；
2、如果目的蛋白检测不到但β-Actin检测到,说明目的蛋白没有表达或者量很低；
3、作为看家基因,β-Actin被认为表达水平不受其它因素影响,是比较稳定的.当细胞接受细胞因子刺激后,目的蛋白的量在参考β-Actin的量后可能发生变化,这时β-Actin还起到一个半定量的作用.
所谓内参就是内部参照的意思.
－－
Western的抗体通常分为一抗和二抗,一抗结合目的蛋白,这是Western变化最多的地方；二抗则比较通用,商品很成熟,二抗带有荧光或者酶标记,它是结合一抗的,但却是得到结果的重要试剂.这种方法属于间接标记.Western很少有直接标记的方法.
做western很重要的一点就是要有一个参照,比如你要检测淋巴细胞某个蛋白的表达,甚至它的变化（比如对某个细胞因子的反应）,这时β-Actin起到几个作用：
1、如果目的蛋白检测不到而且β-Actin也检测不到,那么你的体系有问题,因为β-Actin是看家基因编码的,理论上是100％检测到的；
2、如果目的蛋白检测不到但β-Actin检测到,说明目的蛋白没有表达或者量很低；
3、作为看家基因,β-Actin被认为表达水平不受其它因素影响,是比较稳定的.当细胞接受细胞因子刺激后,目的蛋白的量在参考β-Actin的量后可能发生变化,这时β-Actin还起到一个半定量的作用.
所谓内参就是内部参照的意思.
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Western的抗体通常分为一抗和二抗,一抗结合目的蛋白,这是Western变化最多的地方；二抗则比较通用,商品很成熟,二抗带有荧光或者酶标记,它是结合一抗的,但却是得到结果的重要试剂.这种方法属于间接标记.Western很少有直接标记的方法.