搜狗做题网荧光pcr阴性对照也有峰,怎么了?
来源：学生作业帮 编辑：搜狗做题网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/06/28 21:48:51
荧光pcr阴性对照也有峰,怎么了?
我最近跑荧光pcr,跑了好几次,阴性对照都有峰,但不知是什么原因,是不是引物或水被污染,我想请问一下路过的大侠,做荧光时需要注意什么啊,实验操作时需要有哪些一定得注意的?谢谢啦～
我最近跑荧光pcr,跑了好几次,阴性对照都有峰,但不知是什么原因,是不是引物或水被污染,我想请问一下路过的大侠,做荧光时需要注意什么啊,实验操作时需要有哪些一定得注意的?谢谢啦～
博凌科为-为你阴性对照有起峰,如果是荧光染料法,可能的原因是：污染；引物二聚体.最好电泳确认下.如果是探针法,可能的原因基本上是污染.如果是引物二聚体,那么适当调低引物的加量,如果始终有引物二聚体峰,而且认为有影响的话,那么只能更换引物.如果是污染,那么要注意以下方面的操作.模板添加区和混合液配制区最好分开.做PCR时,在混合液配制区直接把阴性的管子盖给盖上,然后将分装好的各个管子拿到模板添加区,按照低浓度到高浓度的顺序添加.加模板时,每次都要换枪头.但是,如果是大肠杆菌等空气广泛存在的菌体,污染是很难完全避免的.