做流式分选Treg细胞,将CD4和CD25用一种颜色荧光染料FITC标记行吗
来源:学生作业帮 编辑:搜狗做题网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/07/14 23:37:42
做流式分选Treg细胞,将CD4和CD25用一种颜色荧光染料FITC标记行吗
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当然不行.如果你用的流式有2个以上激光,最好一个用FITC(激发光波长488nm),另一个用非488激发的,这样做代偿的时候干扰小.
再问: 我是不是可以先用抗CD4得到CD4+细胞,然后再用抗CD25,去掉CD25+的细胞,这样得到CD25-D的细胞。
再答: 最好不要。你是不是由于一抗都是来源于小鼠,所以只有一种2抗?建议把一抗的一种换为其他物种(比如兔子)的。 要是按照你的方法,都用FITC。那么CD4+的细胞是阳性的(绿色),然后你又要去掉CD25+(又是绿色)。就无法区分了。
再问: 我是不是可以先用抗CD4得到CD4+细胞,然后再用抗CD25,去掉CD25+的细胞,这样得到CD25-D的细胞。
再答: 最好不要。你是不是由于一抗都是来源于小鼠,所以只有一种2抗?建议把一抗的一种换为其他物种(比如兔子)的。 要是按照你的方法,都用FITC。那么CD4+的细胞是阳性的(绿色),然后你又要去掉CD25+(又是绿色)。就无法区分了。
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请问有谁能提供用流式细胞仪检测CD4+CD25+CD127low/-调节T细胞的详细步骤,另外检测是否可用冰冻血?