双氧水使蛋白质变性后,加考马斯亮蓝测样品中蛋白含量会不会有影响
来源:学生作业帮 编辑:搜狗做题网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/08/12 00:07:33
双氧水使蛋白质变性后,加考马斯亮蓝测样品中蛋白含量会不会有影响
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有影响
考马斯亮蓝测定蛋白质的原理:考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种.考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色,当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465nm,后者在595nm.在一定蛋白质浓度范围内(0~100μg/ml),蛋白质-色素结合物在595nm波长下的光吸收与蛋白质含量成正比.
当用双氧水作用蛋白质后,蛋白质结构会发生变化,导致疏水区的外漏,原来的水化膜被破坏,这样再加入考马斯亮蓝,他与蛋白质的结合位点增多,会使测定值偏大,不能正确测出蛋白质的浓度了.
考马斯亮蓝测定蛋白质的原理:考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种.考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色,当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465nm,后者在595nm.在一定蛋白质浓度范围内(0~100μg/ml),蛋白质-色素结合物在595nm波长下的光吸收与蛋白质含量成正比.
当用双氧水作用蛋白质后,蛋白质结构会发生变化,导致疏水区的外漏,原来的水化膜被破坏,这样再加入考马斯亮蓝,他与蛋白质的结合位点增多,会使测定值偏大,不能正确测出蛋白质的浓度了.
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