理想的克隆载体和表达载体所需要的基本原件
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/17 15:30:49
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先回答你的问题,转入外源基因的农杆菌不能较载体,它本身是外源基因的受体,携带外源基因的质粒或者噬菌体才是载体.你想问基因表达载体的构建,这个问题太大,而且表达载体多种多样,用处也很多,所以很难一下子概
启动子,终止子,标记基因,如果还有空就写个复制位点
一般程序如下:获得目的基因-准备表达载体-将目的基因插入表达载体中(测序验证)-转化表达宿主菌-诱导靶蛋白的表达-表达蛋白的分析-扩增、纯化、进一步检测.[主要试剂主要试剂]主要试剂1、LB培养基.2
你得到的cDNA的量是很少的,先放在克隆载体上是为了获得更多的你所需要的cDNA,这样做的话不至于在做完实验后突然发现你要的那个cDNA被你用完了,然后你又要重新再去很复杂的提取
一、载体的功能1.运送外源基因高效转入受体细胞2.为外源基因提供复制能力或整合能力3.为外源基因的扩增或表达提供条件二、载体应具备的条件1.具有对受体细胞的可转移性2.具有与特定受体细胞相适应的复制位
直接就能表达.目的基因由运载体运入宿主细胞,运载体上有启动子再问:克隆载体也有启动子么?再答:有因为目的基因通常都经过了修饰以便表达
一、根据载体的分子生物学特性划分1. 质粒型载体—环状dsDNA分子,自主复制2. 病毒型载体—环状、线状、ss-和ds-DNA分子,形成病毒颗粒3.混合型载体—具质粒和病毒特性,
根据我们实验收藏,原核表达载体Pet-28a比较复合你的要求,而复制载体一般用T载体吧.如果你要的是真核表达载体,我查看了PCMV系列的,都没有Ndel的多克隆位点.不太适合,不过Ndel这个限制性内
你问的这个问题比较难回答,将DNA片段(或基因)与载体DNA分子共价连接,然后引入寄主细胞,再筛选获得重组的克隆,按克隆的目的可分为DNA和cDNA克隆两类.cDNA克隆是以mRNA为原材料,经体外反
作为重组基因的载体,1,必须能够在宿主细胞中复制,使重组基因能够在宿主基因中复制,从而稳定保存下来,这是作为运载体的必须条件.2.具有多个限制酶切点,从而可以使不同的粘性末端与之相连,增强实用性3.拥
再答:应该是这个吧嘻嘻😄
基因表达载体的构建(即目的基因与运载体结合)是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心. 将目的基因与运载体结合的过程,实际上是不同来源的DNA重新组合的过程.如果以质粒作为运载体, 首先要用一定
穿梭质粒是指可以在多种宿主下复制.比如说通常能够在哺乳动物,酵母或者其他细菌复制表达的质粒,同时可以在大肠杆菌内复制.这样利于对质粒的分子生物学操作和大量制备.表达质粒就是指带有启动子,增强子等等,使
克隆载体,顾名思义,主要是用来做克隆或者亚克隆的,也可以用于测序目的,很少用于表达它与表达载体的主要区别,在于缺少强启动子
完整资料.你要的信息在第24页上.
可以这样做:根据目的序列设计引物,5'引物、3'引物加酶切位点,PCR产物连接pGEM-TEasy载体,构建目的基因克隆载体.pGEM-TEasy不知现在还有没有卖的,有点贵,但成功率很高.分别对pC
具有真核细胞启动子元件具有真核细胞的复制起始位点.具有筛选标记.
在基因工程中,携带目的基因进入宿主细胞进行扩增和表达的工具称为载体,载体实际上是具有运载能力的DNA.依据功能,载体可以分为克隆载体和表达载体.克隆载体用于在宿主细胞中克隆和扩增外援片段;表达载体则用
其实没有多大的区别,最大的区别可能是插入片段的大小,在用于构建打片段文库时,需要大容量的克隆载体,如噬菌体一类的;其他的包括复制子,选择标记等都没有区别参考:
完全确保的话,第一,做酶切的两个酶要不一样;二你在做完酶切后,用磷酸化酶处理下,纯化后再连接(这一不会降低连接效率,但会确保质粒不自连.按正确方向克隆