水稻内参基因Ubiquitin
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/08/18 15:37:51
![水稻内参基因Ubiquitin](/uploads/image/f/5724765-45-5.jpg?t=%E6%B0%B4%E7%A8%BB%E5%86%85%E5%8F%82%E5%9F%BA%E5%9B%A0Ubiquitin)
我也遇到过这种问题,个人觉得可能是目的基因的定量引物不好,还有就是要优化PCR条件!
直接在NCBI里面查找金银花的内参基因,如果没有的话,就找与金银花同种属植物的内参基因.我做过猪的,在NCBI里查不到猪的内参基因,我就用的小鼠的,因为是持家基因,所以在哺乳动物里面表达的差异不大,也
可以.定量PCR内参的选择最重要的是这个基因在不同个体之间的此组织(比如是肌肉)表达恒定.所以你需要找好了.
在这个专利文件里面有全长,引物你自己设计吧
要在生物体或细胞内稳定表达的基因才能作为PCR的内参基因,因此又名看家基因,由于在不同细胞、组织中常量表达,没有组织特异性,因此不同昆虫之间可以共同使用内参.再问:那引物是根据自己的物种去具体设计还是
这个要看你在做PCR前的加样量是否一致.如果加样量是一致的,而内参做出来差别大(比如3-4个CT值)那说明你的实验体系有严重的问题.理论上加入的DNA量一样多,内参的CT值应该都一样.如果你能肯定加样
内参的选择:普通PCR内参的大小没有多大要求,但realtime一般选择300bp以下它的作用在于你提取的RNA逆转录成cDNA时,加入的浓度可能会不一致,即使用分光广度计测其浓度,也会有仪器误差.P
就是根据遗传分析进行对水稻某一基因进行定位
可以鉴定出两种状态下细胞总RNA样品内A基因量的差异,但这个差异包含着误差:1,总RNA量的不准确性,虽然用分光光度计计算了浓度,但实际上还是有误差的存在,对那些表达水平只差那么丁点儿的样品尤其关键;
举例说吧,想用RT分析两种不同的细胞(高氧、低氧两种条件的培养物)中A基因的表达水平,RT可以鉴定出两种状态下细胞总RNA样品内A基因量的差异,但这个差异包含着误差:1,总RNA量的不准确性,虽然用分
你说的应该是realtimePCR吧,注意RT其实是逆转录reversetranscription的缩写,和realtime一定要分开来.常说的qPCR,qRT-PCR,都是通过实时(realtime
那是内参引物可能有问题,建议重新设计内参引物
因为内参和目标基因的扩增效率有可能不一样,所以CT值不能直接相减.只能是内参间先算出相对量,目的基因也算出相对量(倍数),然后在用目的基因的倍数除以内参的倍数.再问:一共有三个内参基因,他们的几何平均
这个概念一般是用在定量PCR中.定量PCR是要检测某个基因的表达,降低或者提高,但是当你得出结果以后,你并不知道是它本身的表达降低/提高了,还是你操作过程中造成的误差(比如提RNA时的损失),所以这个
好的内参基因应该受环境影响变化较小,否则不能作为对照与处理的内参.常用内参有actin,ubiquitin,histone等等,一般物种都有常用内参,不建议在这方面发挥.再问:看的文章里筛内参基因时怎
内参就是对照基因,在PCR中,就是肯定能用PCR扩增出来的基因,无论你要扩增什么生物,比如你做的是真菌,都可以扩的出来.阳性对照的目的,有两个:一个是帮助你判断你的PCR扩增的过程中有没有出现什么问题
不同基因之间表达量差异很大,可达上千甚至上万倍之差,所以CT值差10以内属正常现象,但通常选用内参基因属于表达量较高的持家基因,如果目标基因和内存基因表达量(CT值差)过大,用内参基因来衡量目标基因的
2,基因是DNA,所以核糖体没有,根尖细胞没有叶绿体没错,只有在光的刺激下,大部分质体才会变成叶绿体
我不了解你的实际情况,我给你几条建议:1.可能是内参引物有问题2.你扩增内参基因的PCR条件设计可能有问题,如Tm3.你用的是一块胶吗?加核酸染料了吗?
一个一个查的:Oryzasativasspjaponicacv.Nipponbareactin:LOC_Os03g61970Oryzasativasspjaponicacv.Nipponbarealp