提取DNA的时候跑电泳发现了rna污染,能不能重新加入RNase
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/08/16 08:20:36
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4片叶子.
a)磁珠法中的细胞裂解液是一种蛋白变性剂,可使动植物的细胞裂解,并使与DNA结合的蛋白质变性,DNA游离释放,磁球可以特异地吸附DNA,通过洗涤,去除DNA以外的RNA、蛋白质等杂质,再因洗脱液解离吸
你说的是粗提取吧?注意事项:first实验材料不能用猪血代替鸡血,因为哺乳动物成熟红细胞木细胞核儿~~second制备鸡血细胞液时,注意向鸡血中加入柠檬酸钠,防止血液凝固3搅拌时沿一个方向搅拌4使细胞
蛋白污染会在电泳孔有亮带,跑不出来.RNA污染会在最下边,一团弥散的亮带,但DNA如果降解的话也有这种现象.
600是多在中间,还是加在一头?其他的序列还一样吗?说具体一些如果是在中间,扩增的是cDNA的话,有可能是mRNA的alternativesplicing
不应该啊,一般应该会比较多才是.或者就是你破细胞不完全,或者就是样本反复冻融次数多了,影响了DNA含量,或者样本太少了?.
这个与琼脂糖电泳有关.提取的DNA分子量很大,可能在40K到100K左右.也有可能在这个范围.但普通的琼脂糖电泳.在大分子的时候根本分别不出来.如果你有DL15000的MARKER你就知道,象那个一万
质粒DNA提取一般用沸水浴法和碱裂解法,现在一般都采用碱裂解法,并有试剂盒可用,它主要是将细胞内的环状质粒提取出来,一般需要用SDS裂解,RNA酶降解,然后过柱,再进行洗脱.过程比较简单.而基因组DN
汗,没听说过氨苄青霉素可以破坏细胞壁的,这样子的话就不需要碱裂解了,氨苄青霉素肯定是在扩增菌体的时候加入培养基的,不会对提取本身造成影响,但是可以阻止杂菌生长,增加目的质粒的拷贝数(前提是,质粒是氨苄
我跑过700bp的电泳,用1.5%-2%的胶都是可以的.电压在120-130V之间,大致时间在30-40分钟.根据你们不同电泳仪的设置,可以观察溴酚兰条带来判断时间.一般溴酚兰接近胶的末端时,就可以了
SNP是单碱基突变,只人群中这一位点存在2个或以上可能的碱基,一般用基因频率表示在人群中携带这种突变等位基因的频率.人基因组是双倍体,存在三种基因型——不携带突变,携带单突变和双突变.对其中的双链DN
PRC跑不出来先考虑是不是模板的问题,是不是DNA没有抽出来,可以把抽出来的东西跑个胶看一看.如果抽出来了,但是PCR没跑出来,就把模板浓度降低一下;如果DNA没跑出来,就要从抽提步骤上找问题.你们用
试剂盒应该没有问题,因为不久前还用,都提出来了.而且因为提不出来,就PRC跑不出来先考虑是不是模板的问题,是不是DNA没有抽出来,可以把抽出来再问:我提出来的DNA杂质太多,PCR过后电泳,拖尾现象严
看你提的什么DNA,基因组的话,是不好看,要是质粒,一般都会非常好看的,如果有蛋白质,点样孔会发亮并在附近有拖尾,但不影响判带的,RNA的话会比较麻烦,你可以用RNAase处理下就行了
测OD的方法是测不出RNA污染的,因为RNA的260/280的值和DNA近似.电泳检测的话,主要是看RNA的含量.换而言之,实际上最相关的是你提取的时候的组织的生长状况.一般来说,如果是分生组织等提取
因为被扩增的条带亮度太大如果你设成自动曝光的话曝光时间肯定不够看到别的手动设置延长曝光时间应该能看到不过也可能被扩增的条带给掩盖
质粒有环状线型和超螺旋三种状态,因为二级结构不同所以电泳中跑得快慢不一,超螺旋最快线型第二环状最慢,而空质粒是线性的其条带位置与Marker位置相符,其他两种分别在其上下两侧,你的样品大多都是三条带,
采集新鲜粪便样品,使用100%乙醇保存.通过重复离心富集研究动物的肠道脱落细胞,并使用乙醇和双蒸水洗涤以除去抑制物.用1%的SDS快速裂解细胞,离心除去残渣后,向裂解液中加入蛋白酶进行消化.消化结束后
当然不一样啦RNADNA都可以用EB或者genefinder蛋白的话不需要染料电泳完如果想直接再胶上看就用考马斯亮蓝染色如果要特异性的检测某个蛋白就转膜后孵育抗体然后显色
真菌的细胞成分和植物是有差别的,这种专一性的植物DNA提取试剂盒不一定能提好真菌的DNA.如果有条件你最好是买专一性的真菌DNA提取试剂盒.不过植物DNA提取的CTAB法确实可以适用于真菌的DNA提取