20种氨基酸用离子交换层析法分离顺序
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/08/17 14:16:42
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离子交换内的介质一般是树脂,阳离子交换型的,使用前树脂先用碱处理成钠型,将氨基酸混合液(pH=2-3)上柱,pH=2-3时,氨基酸主要以阳离子形式存在,与树脂上的钠离子发生交换而被“挂”在树脂上,再用
氨基酸的分离鉴定——纸层析法一,实验目的掌握氨基酸纸层析的方法和原理,学会分析待测样品的氨基酸成分.二,实验原理纸层析是以滤纸为惰性支持物的分配层析.滤纸纤维上的羟基具有亲水性,吸附一层水作为固定相,
氨基酸分离鉴定现在都用液相色谱做,你说的这个层析法,误差太大,早没人用了.
因为人的皮肤代谢物里也有氨基酸啊,如果直接接触,层析纸上会留下你的指纹,很明显的,甚至比层析出来的氨基酸的浓度都要高,干扰实验
离子交换层析:离子交换层析离子交换层析是利用离子交换剂上的可交换离子与周围介质中被分离的各种离子间的亲和力不同,经过交换平衡达到分离的目的的一种柱层析法.该法可以同时分析多种离子化合物,具有灵敏度高,
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选c亲和柱/亲和膜,都是医用分离器.如除内毒素亲和柱,以Sepharose4B为基质,配基为组氨酸,壳聚糖,季铵盐等
6.洗脱:用含NaCL(0.2-0.6M)的0.02MTris-HCL缓冲液pH7.4(内含0.等电聚焦电泳(IEF)分离蛋白及测定蛋白质等电点一、原理等电点聚焦(IEF)
所有的层析在原理上都是相通的,区别在于流动相和层析剂之间的作用力的不同.离子交换是利用蛋白质表面的电荷与层析剂上的离子基团的静电作用.凝胶过滤层析利用了凝胶的多孔性,根据溶剂分子的大小进行分离.
离子交换层析在蛋白质分离纯化中有非常广泛的应用,在样品富集,中度纯化和精制阶段都可以采用.另外还可以利用离子交换层析去除DNA和内毒素.因此在生物制品工艺中应用非常广泛.关键是要选择合适的介质和分离条
纸层析法(paperchromatography)是生物化学上分离、鉴定氨基酸混合物的常用技术,可用于蛋白质的氨基酸成分的定性鉴定和定量测定.纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法,其中滤纸纤维素
叶绿体色素的提取和分离(纸层析法)原理叶绿体色素是植物吸收太阳光能进行光合作用的重要物质,主要由叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素组成.从植物叶片中提取和分离色素是对其认识和了解的前提.利用叶绿体色
你们是不是这样分析的:组氨酸的PI是7.59,赖氨酸是9.74,这证明赖氨酸碱性更强,酸性更弱,而用H+洗脱时,先洗脱是应该是酸性弱的物质所以赖氨酸应该先洗脱下来?或许可以这样解释:碱性氨基酸和阳离子
实验中出现的问题及解决的方法:1.层析结果中斑点拖尾了,解决方法:调节溶剂系统的极性配比,点样干燥时候不要用太热的风吹干,急躁反而效果不好.2.斑点走歪了,解决方法:一定把层析纸吊垂直.3.无斑点出现
柱温;柱长径比;进料量;进料浓度;洗脱速度;洗脱液pH;交换柱配体的极性强弱;树脂交联度;树脂粒径等因素都会有影响.
1,离子交换树脂固定床的床层压力会随着分离过程的进程而不断加大,需要重新填充.同时,也造成固定床填充过程操作麻烦,而且密封性要求高.2,蛋白质分离纯度问题,如果在出峰之后再行切换接收馏分,而在峰行下降
蛋白质所带电荷不同
不能纸层析法是分离色素提取液的
建议用离子交换层析.凝胶过滤层析流速慢,上样量低,而且分离效果一般,凝胶过滤一般用于层析的后期包括除盐,去除降解片段之类的.离子交换一般就用到DEAE,因为大部分蛋白都偏酸.要是你的酶是碱性蛋白,那就